Метод Бочкова

Самый полный справочник по болезням сельскохозяйственных животных
Условные обозначения:
Free Content - Интересное
New Content - Новое
Open Access Content - Старое
Subscribed Content - Полезное
Free Trial Content - Важное

Основное назначение метафазного метода исследования заключает­ся в том, чтобы у каждой хромосомы набора четко выявить форму, размер и специфические признаки. Это достигается обработкой кле­ток колхицином, а затем воздействием гипотонического раствора трехзамещенного лимоннокислого натрия (концентрация 0,7—-1%). Колхицин способствует расщеплению хромосом на хроматиды, кото­рые удерживаются вместе только в области центромеры, а гипотони­ческий раствор используют с целью разброса хромосом. Последующая фиксация и окраска клеток дает возможность получить широко рас­сеянный (по всей площади клетки) набор хромосом.

Приготовление препаратов. Для приготовления препаратов хромосом ис­пользуют метод Н. Бочкова, Л. Немцевой (1962) с некоторыми изменениями. Пункцию костного мозга у крупного рогатого скота проводят иглой ИС-2 в об­ласти 2—3-го сегмента грудной кости. 0,2—0,3 мл пунктата суспендируют в 10 — 15 мл среды 199, содержащей 1—2 мкл 0,02%-ного раствора колхицина на 1 мл суспензии. После механического удаления фибрина (путем энергичного встря­хивания пробирки с материалом в течение 5—10 секунд) и 30—40-минутвои ин­кубации в термостате при температуре 38° материал центрифугируют при 100 об/мин в течение 5 минут. Надосадочную жидкость опять удаляют, а к осадку осторожно по стенке пробирки добавляют 2—3 мл свежеприготовленного охлажденного до 4° фиксатора, состоящего из 3 частей метилового спирта и 1 части ледяной уксусной кислоты. Через 5—10 минут фиксатор удаляют, а осадок суспендируют в новой порции фиксатора и фиксируют при 4° в течение 1 часа. Затем готовят препараты, предварительно сменив фиксатор.

 

Условные обозначения:
Free Content - Интересное
New Content - Новое
Open Access Content - Старое
Subscribed Content - Полезное
Free Trial Content - Важное
Сообщить информацию с помощью: Эти иконки ведут на различные социальные сервисы
Карточка
Настройки
Не зарегистрирвоаны?
войти
Text size: A | A | A | A
Качественные светодиодные ленты для помещений и улицы. Гарантия
furkom.ru